Ediciones Universidad de Salamanca / CC BY-NC-SA Ciencia Policial, 182, 145-172 156 CIENCIAPOLICIAL investigación. Inicialmente se utilizaba el método Sanger, tardando meses en finalizar el trabajo y con alto coste económico (Gupta y Verma, 2019). Hoy día, con el gran desarrollo en el campo de la genómica, las técnicas denominadas NGS (Next-Generation Sequencing) consiguen reducir en gran medida tanto el tiempo de trabajo como los costes de los ensayos. La primera técnica de secuenciación, la técnica Sanger, fue descrita en 1977, y hasta la primera década del 2000 no se desarrollaron otros procedimientos. Las tecnologías de secuenciación se multiplicaron con el comienzo del siglo XXI, llamándose NGS de segunda generación, que utilizan la amplificación clonal para fortalecer la señal de detección, mejorando en gran medida las prestaciones (Goodwin, McPherson y McCombie, 2016). Ya en la segunda década del 2000 se mejoran las técnicas con las NGS de tercera generación, las cuales no necesitan una fase de amplificación, lo que acorta los tiempos en la preparación de las muestras, evitando los errores en esta fase. También se reduce la cantidad de ADN necesario, muy importante en los casos en los que la muestra tenga poca cantidad de material genético. Los genomas más grandes pueden ser secuenciados al completo en cuestión de semanas y aquellos más pequeños como los bacterianos y los virales en tan sólo unos pocos días. Como ejemplo de esta velocidad de secuenciación, en tan sólo 62 horas se consiguió un borrador de la secuencia completa de la cepa de Escherichia coli responsable del brote causante de la muerte de 53 personas en Alemania en 2011 (Schmedes y Budowle, 2009), usando una tecnología NGS de segunda generación. Consecuentemente, las NGS generan una gran cantidad de datos en poco tiempo, que deben ser tratados con sistemas informáticos y revisados para evitar errores. Por ello es esencial que estos avances en secuenciación vayan acompañados con el desarrollo de la bioinformática. Todas estas técnicas ya están siendo utilizadas en el análisis sin sesgo de muestras complejas en las que hay una mezcla de microorganismos, denominándose metagenómica esta rama de la genómica en la que se secuencian todos los genomas presentes en una muestra. Para una muestra que contenga principalmente una mezcla bacteriana, el problema se puede abordar desde dos puntos de vista, bien dirigiendo la secuenciación a ciertas
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